RNA结合基元蛋白3(RBM3)多克隆抗体
Polyclonal Antibody to RNA Binding Motif Protein 3 (RBM3)
IS1-RNPL; RNPL; Putative RNA-binding protein 3
信号转导
编号XYG653Hu01
物种Homo sapiens (Human，人) 相同的名称，不同的物种。来源多抗制备
宿主兔
效价-
Ig类型 IgG
纯化方式抗原特异性亲和纯化
标记物无标记物
**原 -
缓冲液成份磷酸盐缓冲液（pH7.4,含有0.02% NaN3和50%甘油）
性状液体
浓度500μg/mL
且适物种Mus musculus (Mouse，小鼠), Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
RNA结合基元蛋白3(RBM3)多克隆抗体应用WB; IHC; ICC; IP.如果抗体需用于流式细胞术，请参见流式抗体。
规格:10μg/20μl
50μg/100μl100μg/200μl 1mg/2ml 1g (保证有货 万一缺货 免费重做)
单克隆抗体优点：特异性强；缺点：亲和力不强，制备成本高，时间长。
多克隆抗体优点：亲和力较强，制备相对便宜，时间短；缺点：特异性不强。
抗原刺激机体，产生**学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组**球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的**球蛋白就是抗体。一般而言，抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体
，由多个B**细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体 ， 本篇主要讲述兔源性多克隆抗体制备的相关流程。
抗原有两个基本特性，即抗原性和**原性。有抗原性的物质不一定有**原性，所以由此引出半抗原和完全全抗原，半抗原必须经过经过一定的改造（偶联蛋白载体BSA，OVA或者HSA等大分子物质）方能成为完全。一般而言完全抗原分子量越大（大于10KDa），结构越复杂引起**反应的能力也就越强。
抗体就是能与特异性抗原结合的**球蛋白，抗体一般分为多克隆抗体和单克隆抗体，多克隆抗体能与抗原的多个表位结合。本篇主要讲述兔来源的多克隆抗体的生产步骤
RNA结合基元蛋白3(RBM3)多克隆抗体一般制备流程：完全抗原的准备→兔子的**→
效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。
具体实验步骤如下：
1.兔子的准备
挑选健康的6周大小的新西兰大白兔两只（约2Kg），使其适应新的生活环境，至少稳定几天再进行**取血.
预采血（作阴性参照用）
1.1 将兔子小心的放入固定的架中,使兔子平静；
1.2小心剃去兔耳上的毛以使血管清晰可见(也可不剃)；
1.3如果有必要,可用小棉球沾酒精涂抹血管部位,使血管膨胀；
1.4用注射器从耳静脉抽取约10ml血液(约5ml血清)；
1.5小心抽出针头,适当按压伤口以免流血,然后用酒精棉球**伤口；
1.6将收集的血液置于37`C灭活30min,*后置于4`C过夜使其凝结释放血清；
1.7将凝结好的血液在10000r／min离心10min； h.收集上清，即为血清。
2. 兔子的**
2.1 注射两只兔子的抗原为1ml,抗原缓冲溶液必须不含对兔子有害的化学试剂.每只兔子初次**400ug抗原比较适合,也可适当减少以获得更好的结果，后续**每次为100ug即可。
2.2 将1ml的佛氏完全佐剂与准备好的1ml抗原充分混匀,呈乳白色；
2.3 小心从笼中取出兔子，每只兔子**4个部位(背部和大腿根部均可),每个部位250ul,针头呈45度角插入皮下1-2cm,注射完后停留数秒以防止抗原外流。
2.4 **周期为20天,**完后7-10天取血(包括中途测试取血和*终放血),总共**4-5次。
3.RNA结合基元蛋白3(RBM3)多克隆抗体效价检测
3.1 2个参照:阴性参照为预取血血清，均以1抗起始浓度稀释(封闭稀释液);阳性参照为以前阳性血清
3.2 于96孔板中每孔滴加100ul，1ug/ml抗原，于4℃过夜，也可以37℃孵育2小时。
3.3倒掉抗原溶液，每孔加入200ul的封闭液，4℃过夜或者37℃孵育2小时。
3.4倒去封闭液，在吸水纸上拍打尽量吸干残留液体,用洗涤液洗板三次,每次尽量拍干残留液体,若要放置一段时间, 37℃烘干并用封口袋封好于-20℃存放。
3.5取包被好的96孔板，**孔加入阴性参照液100ul，**孔加入阳性参照液100ul，第三孔加入1:500的待测抗血清，后续各孔在此基础上倍比稀释，于37℃孵育1 小时。
3.6倒掉液体，用洗涤液洗板三次，拍干。每孔加入100ul的HRP标记的小鼠抗兔IgG（1：2000稀释），于37℃孵育45分钟。
3.7倒掉液体，用洗涤液洗板三次，拍干。每孔加入100ul的TMB底物（Sigma 单组份TMB ）37℃孵育5—20分钟(根据颜色深浅来决定显色的时间)。
3.8每孔加入50ul的终止液（2N H2SO4），在酶标仪上读取波长450nm处的吸光值。
抗体效价检测达到100万以上后可以对兔子进行终放血?？固宓拇炕?span lang="EN-US">